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                  免疫复合物(Immune Complexes,IC)的检测(1)

                  作者:中华医学网发布时间:2017-10-12 17:32浏览:

                  免疫复合物在体内存在有两种方式,一是存在于血液中的循环免疫复合物(CIC),一是组织中固定的免疫复合物。免疫复合物的检测技术可分为抗原特异性方法和非抗原特异性方法。在大多数情况下,免疫复合物中的抗原性质不太清楚或非常复杂,所以抗原特异性方法并不常用。

                  一、循环免疫复合物的检测

                  根据免疫复合物的物理学、免疫学和生物学特性,已经设计出很多检测CIC的方法(表1)。

                  表1 循环免疫复合物的常用检测方法
                  类别 原理 方法 敏感性 备注
                  物理法 分子大小 1、超速离心 —— 适于研究
                  2、分子 超滤

                  ——

                  适于研究
                  3、凝胶过滤 30μg 适于研究
                  溶解度 1、PEG沉淀 20μg 粗定量,易推广
                  2、冷沉淀 —— 定性,临床应用
                  补体法 固定补体,结合C1q 抗补体试验 0.1μg 常用,特异性差
                  1、C1q凝胶沉淀试验 100μg 定性,不易普及
                  2、C1q偏离试验 4μg 不易普及
                  3、液相法 10μg 不易普及
                  4、固相法 1μg 不易普及
                  胶固素 胶固素结合试验 3μg 敏感,稳定
                  抗Ig法 结合RF 1、RF凝胶沉淀试验 100G 定性,不敏感
                  2、mRF固相抑制试验 1~20μg 不易普及
                  3、PRF凝集抑制试验 1~10μg 不易普及
                  结合Ig 抗 抗体法 2~3μg 不易普及
                  细胞法 Fc受体 1、血小板凝集试验 1~4μg 需新鲜制备
                  2、ADCC抑制试验 5~10μg 细胞活性质控难
                  3、Mφ吞噬抑制试验 0.03μg 细胞活性质控难
                  补体受体 1、Raji细胞法 6μg 需维持细胞株
                  2、花环抑制试验 10μg 影响因素多

                  (一)物理测定法

                  1、聚乙二醇法 聚乙二醇(PEG)是乙二醇聚合而成的无电荷形多糖分子,分子量变化范围较大,常用的分子量是6000。用3%~4%浓度的PEG可以选择性地将大分子免疫复合物沉淀下来,其作用机制尚不甚清楚。将PEG溶液与待检血清混合,置4℃冰箱过夜后离心,将沉淀物用PEG溶液充分洗涤,重新溶解于 0.01mol/L的NaOH中,在波长280nm下测量溶液的吸光度;也可利用散射比浊 法直接测定PEG沉淀的免疫复合物;以不同浓度的热聚合IgG作为参考标准来计算CIC的含量。聚乙二醇法简单易行,可在临床工作中推广。但此法易受多种大分子蛋白和温度的干扰,特异性稍差。PEG法还特别适用于沉淀获得CIC,再进行解离分析其中的抗原与抗体